Il bi-test è un'analisi del sangue materno che misura la concentrazione di due marcatori biochimici prodotti dalla placenta: la PAPP-A (Pregnancy-Associated Plasma Protein A) e la free beta-hCG (frazione libera della gonadotropina corionica umana). Nelle gravidanze con feto affetto da trisomia 21 (sindrome di Down), la PAPP-A tende a essere ridotta e la free beta-hCG tende a essere aumentata rispetto ai valori attesi per l'età gestazionale; nelle trisomie 18 e 13 entrambi i marcatori risultano ridotti. Il prelievo viene eseguito tra la 9ª e la 13ª settimana di gravidanza e i valori misuratii vengono convertiti in multipli della mediana (MoM), corretti per peso corporeo, etnia, fumo e numero di feti. Il rischio individuale di trisomia 21, 18 e 13 viene calcolato combinando i valori biochimici con la misurazione ecografica della translucenza nucale e l'età materna (test combinato). Il test combinato raggiunge una sensibilità per la trisomia 21 di circa il 90% con un tasso di falsi positivi del 5%. In base al rischio calcolato, la coppia può successivamnete essere indirizzata verso il test del DNA fetale circolante (NIPT) per uno screening di secondo livello non invasivo, o verso la diagnosi prenatale invasiva con villocentesi o amniocentesi.