Il peptide C (Connecting Peptide) è un frammento peptidico di 31 aminoacidi che collega le catene A e B della proinsulina nelle cellule beta del pancreas. Durante la maturazione della proinsulina nei granuli secretori, le endopeptidasi PC1/3 e PC2 scindono il peptide C, rilasciandolo nel sangue in quantità equimolari all'insulina durante l'esocitosi. A differenza dell'insulina, il peptide C non viene estratto dal fegato al primo passaggio epatico (dove il 50-60% dell'insulina viene captato) e ha un'emivita più lunga (circa 30 minuti contro 5 minuti dell'insulina), rendendolo un indicatore più affidabile e stabile della secrezione insulinica endogena. Il dosaggio si esegue su siero con immunoassay (chemiluminescenza, ECLIA). Il peptide C è fondamentale nella diagnosi differenziale dell'ipoglicemia: un peptide C elevato con insulina elevata indica iperinsulinismo endogeno (insulinoma), mentre un peptide C soppresso con insulina elevata indica somministrazione esogena di insulina (ipoglicemia factitia). Nella classificazione del diabete, il peptide C permette di valutare la funzione residua delle cellule beta: è molto ridotto o assente nel diabete di tipo 1 (distruzione autoimmune) e conservato o elevato nel diabete di tipo 2 iniziale (insulino-resistenza con iperinsulinismo compensatorio). Il peptide C stimolato (dopo glucagone o pasto misto) è più informativo del basale per valutare la riserva pancreatica.