L'insulina è un ormone peptidico di 51 aminoacidi prodotto dalle cellule beta delle isole di Langerhans del pancreas, secreto in risposta all'aumento della glicemia dopo i pasti. L'insulina promuove l'ingresso del glucosio nelle cellule muscolari e adipose tramite il trasportatore GLUT4, stimola la glicogenosintesi nel fegato e nel muscolo, la lipogenesi e la sintesi proteica, e inibisce la gluconeogenesi e la lipolisi. Il dosaggio si esegue su siero a digiuno con immunoassay (chemiluminescenza, ECLIA). I valori normali a digiuno sono indicativamente 2-25 µUI/mL. L'insulinemia a digiuno, combinata con la glicemia, permette il calcolo dell'indice HOMA-IR (Homeostasis Model Assessment of Insulin Resistance = glicemia mg/dL × insulina µUI/mL / 405): valori superiori a 2,5-3,0 indicano insulino-resistenza, caratteristica della sindrome metabolica e del diabete di tipo 2. Nell'ipoglicemia, un'insulinemia inappropriatamente elevata (insulina superiore a 3 µUI/mL con glicemia inferiore a 55 mg/dL) con C-peptide elevato suggerisce insulinoma (tumore neuroendocrino delle cellule beta); se il C-peptide è basso indica somministrazione esogena di insulina. Il dosaggio dell'insulina è influenzato dalla terapia insulinica esogena (gli anticorpi anti-insulina interferiscono) e dal tipo di immunoassay utilizzato.