La fosfatasi alcalina (ALP) è un gruppo di isoenzimi che catalizzano l'idrolisi degli esteri fosforici a pH alcalino. Le principali fonti sieriche sono il fegato (isoenzima epatico, localizzato sulla membrana dei canalicoli biliari), l'osso (isoenzima osseo, espresso dagli osteoblasti durante la neoformazione ossea), l'intestino e la placenta. Il dosaggio si esegue su siero con metodo cinetico utilizzando p-nitrofenilfosfato come substrato: l'enzima libera p-nitrofenolo, un cromogeno giallo quantificabile a 405 nm. Valori normali nell'adulto sono indicativamente 40-130 U/L, ma nei bambini e negli adolescenti sono fisiologicamente 2-3 volte più elevati per l'intensa attività osteoblastica della crescita. L'ALP è un marcatore chiave di colestasi: nelle ostruzioni biliari extraepatiche (calcoli, tumori della testa del pancreas) e intraepatiche (farmaci, cirrosi biliare primitiva) l'isoenzima epatico aumenta per induzione della sintesi e per il rigurgito nel sangue. L'isoenzima osseo aumenta nel morbo di Paget (spesso con ALP molto elevata), nelle metastasi ossee osteoblastiche, nell'iperparatiroidismo, nell'osteomalacia, nelle fratture in via di guarigione e nella crescita. Per distinguere l'origine epatica da quella ossea si può dosare la gamma-GT (elevata nella colestasi ma non nelle patologie ossee) o determinare gli isoenzimi della ALP. In gravidanza l'isoenzima placentare contribuisce all'aumento fisiologico nel terzo trimestre.