Il test di Coombs diretto (o test dell'antiglobulina diretta, DAT) è un'analisi immunoematologica che rivela la presenza di anticorpi (IgG) o frazioni del complemento (C3d) legati in vivo alla membrana dei globuli rossi del paziente. Il principio si basa sull'utilizzo di un siero di Coombs — contenente anticorpi anti-IgG umane e anti-C3d — che, quando aggiunto a una sospensione di globuli rossi lavati del paziente, causa agglutinazione se su di essi sono presenti le immunoglobuline o il complemento ricercati. Il test viene eseguito con metodica in gel (test in colonna) o in microplacca, e il risultato viene espresso come negativo o positivo (con gradi di 1+ a 4+), con eventuale specificazione della classe di anticorpo rilevata. Un test di Coombs diretto positivo si riscontra in: anemia emolitica autoimmune (AIHA) a anticorpi caldi (IgG) e a anticorpi freddi (IgM con fissazione del complemento C3d); malattia emolitica del neonato (da incompatibilità materno-fetale per ABO o Rh); reazione emolitica trasfusionale ritardata (da anticorpi alloimmuni formatisi dopo trasfusioni precedenti); anemia emolitica da farmaci (per alcuni antibiotici, FANS, antipertensivi). Il test è routinariamente impiegato nell'iter diagnostico dell'anemia emolitica e in tutti i casi sospetti di reazione trasfusionale avversa con comparsa di emolisi. La negatività del Coombs diretto non esclude un'emolisi di natura non immune (difetti enzimatici, emoglobinopatie).