Il test di provocazione orale (TPO) con allergeni alimentari, o oral food challenge (OFC), è considerato il gold standard per la diagnosi di allergia alimentare mediata da IgE o non-IgE mediata, e per la valutazione della tolleranza acquisita in pazienti con allergie in follow-up. La procedura prevede la somministrazione in dosi crescenti e a intervalli prestabiliti dell'alimento sospettato — come latte, uovo, arachide, grano, pesce, crostacei o frutta secca — partendo da quantità molto piccole (a volte inferiori a 1 mg di proteina) fino a raggiungere la dose equivalente alla porzione normale di consumo. L'esame è eseguito obbligatoriamente in ambiente ospedaliero o ambulatoriale specificamente attrezzato, con monitoraggio continuo del paziente per almeno 2-4 ore dopo l'ultima dose, da parte di personale medico e infermieristico con esperienza in allergologia e pronto a gestire reazioni anafilattiche con adrenalina, antistaminici, corticosteroidi e ossigenoterapia. Il test può essere aperto (paziente e medico conoscono l'alimento somministrato), singolo cieco o doppio cieco contro placebo (DBPCFC), quest'ultimo considerato lo standard di riferimento per la ricerca clinica. Le indicazioni principali includono: conferma diagnostica dopo test cutanei o IgE specifiche positivi, valutazione della soglia di reattività individuale, verifica della tolleranza nel bambino che ha superato l'allergia, e introduzione controllata di alimenti dopo immunoterapia orale.